酶聯(lián)產(chǎn)品主要生產(chǎn)工藝

一、原理

ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原-抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。

二、主要生產(chǎn)工藝

（一）酶標板的制備：

1.工藝流程

（A）包被液的配制→ （C）酶標板的包被 →（D）酶標板封閉 → （E）酶標板的干燥、真空包裝                       ↑

                                     （B）封閉液的配制

2.關鍵點控制

（1）包被：

1）確認配制溶液的PH值在要求范圍內；

2）包被液量控制在要求范圍內；

3）溫育或冷育的溫度、時間在要求范圍內。

關鍵設備包括：包被機、精密天平、加樣器。

（2）封閉：

1）確認洗板的次數(shù)；

2）確認配制溶液的PH值在要求范圍內；

3）封閉液量控制在要求范圍內；

4）溫育或冷育的溫度、時間在要求范圍內。

關鍵設備包括：包被機、洗板機、精密天平、加樣器。

（3）干燥、真空包裝

1）干燥的溫濕度在要求范圍內；

2）干燥結束的酶標板逐一裝入鋁箔袋中同時放入一袋干燥劑，裝袋同時要將酶標板標識不清楚的、板孔有缺損的挑出報廢。

關鍵設備包括：真空包裝機。

（二）酶標試劑的制備：

1.工藝流程

（A）液體的配制→（B）液體的分裝

2.關鍵點控制

（1）液體配制過程物料量取準確；

（2）確認配制溶液的濃度、PH值在要求范圍內；

（3）控制液體分裝量范圍，要求滿足要求。

關鍵設備包括：精密天平、分裝機。

（三）陰、陽性對照的制備：

1.工藝流程

（A）原料的滅活→（B）液體的配制→（C）液體的分裝

2.關鍵點控制

（1）控制滅活溫度和時間；

（2）液體配制過程物料量取準確；

（3）控制液體分裝量范圍，要求滿足要求。

關鍵設備包括：水浴鍋、精密天平、分裝機。

（四）其他組分的制備：

1.工藝流程

（A）液體的配制→（B）液體的分裝

2.關鍵點控制

（1）液體配制過程物料量取準確；

（2）確認配制溶液的PH值在要求范圍內

（3）控制液體分裝量范圍，要求滿足要求。

關鍵設備包括：精密天平、分裝機。