(膠體金法)生產(chǎn)工藝規(guī)程模板--乙型肝炎病毒表面抗體檢測(cè)試劑（膠體金法）生產(chǎn)工藝規(guī)程 

1.  適用范圍

適用于乙型肝炎病毒表面抗體檢測(cè)試劑盒（膠體金法）的生產(chǎn)和質(zhì)量控制。

2.  職責(zé)

研發(fā)部：制定本規(guī)程。

生產(chǎn)管理部：執(zhí)行本規(guī)程

質(zhì)量管理部：按本規(guī)程執(zhí)行，監(jiān)督本規(guī)程的執(zhí)行情況。

3.  內(nèi)容

3.1.依據(jù)

《乙型肝炎病毒表面抗體檢測(cè)試劑（膠體金法）》產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)

3.2.產(chǎn)品名稱、劑型、規(guī)格

3.2.1名稱：

(1) 商品名：乙型肝炎病毒表面抗體檢測(cè)試劑（膠體金法）

（2）英文名：Diagnostic Kit for Antibody to Hepatitis B Surface Antigen(Colloidal Gold Immunochromatagraphic Assay)

（3）漢語(yǔ)拼音名：Yixing Ganyan Bingdu Biaomian Kangti Jiance  Shiji（jiaotijin  Fa）

3.2.2.類型：三類6840體外診斷試劑。

3.2.3.規(guī)格：100T/盒(25T/筒*4筒)（無卡）；25袋/盒（1支/袋）、50袋/盒（1支/袋）

3.3.產(chǎn)品概述

乙型肝炎病毒表面抗體檢測(cè)試劑（膠體金法）采用膠體金免疫層析分析原理、雙抗原夾心法，在玻璃纖維紙上預(yù)包埋金標(biāo)記重組乙型肝炎病毒表面抗原，在硝酸纖維素膜上檢測(cè)線（T）和質(zhì)控線（C）分別包被重組的乙型肝炎病毒表面抗原和羊抗兔IgG。當(dāng)檢測(cè)樣本為陽(yáng)性時(shí)，樣本中的乙肝病毒表面抗體與膠體金標(biāo)記的重組乙肝病毒表面抗原結(jié)合形成復(fù)合物，由于層析作用復(fù)合物沿紙條向前移動(dòng)，經(jīng)過檢測(cè)線（T）時(shí)與預(yù)包被的重組乙肝表面抗原反應(yīng)，形成免疫復(fù)合物而顯現(xiàn)紅色條帶，游離金標(biāo)記的兔IgG則在質(zhì)控線（C）與羊抗兔IgG結(jié)合顯現(xiàn)紅色條帶。陰性樣本則僅在質(zhì)控線（C）顯色。

3.4.試劑盒組成、儲(chǔ)存、有效期

3.4.1.試劑盒組成：

3.4.2儲(chǔ)存條件：2-30℃保存。

3.4.3.有效期：24個(gè)月。

3.5.生產(chǎn)工藝流程圖文件末（23頁(yè)）。

3.6.生產(chǎn)工藝過程及工藝條件

3.6.1配液

根據(jù)以下各配方，按各相關(guān)試劑配制作業(yè)指導(dǎo)書進(jìn)行配制。

（1）     

（2）     

（3）     

3.6.2樣品稀釋液分裝

按照《液體分裝作業(yè)指導(dǎo)書》，根據(jù)相應(yīng)規(guī)格的裝量要求進(jìn)行分裝，分裝量＝ 規(guī)格 + 附加量。如下表所示（單位：ml/瓶）：

3.6.3 膠體金制備

（1）    量取   ml超純水到適當(dāng)大小的燒瓶中；

（2）    量取    ml燒金溶液A并加入燒瓶中；

（3）    水沸騰后，加入已經(jīng)平衡的燒金溶液B    ml；

（4）    水繼續(xù)沸騰5分鐘關(guān)閉加熱攪拌器，并將燒瓶移至桌面，用鋁箔紙蓋住瓶口，讓膠體金自然冷卻。

（5）    膠體金的儲(chǔ)存：2～8℃；有效期6個(gè)月。

3.6.4膠體金標(biāo)記

3.6.4.1根據(jù)試樣驗(yàn)證結(jié)果，量取膠體金，快速攪拌中加入0.2MK₂CO₃液，混勻后，快速攪拌中加入相應(yīng)量的乙肝抗原或兔IgG(乙肝抗原和兔IgG分開標(biāo)記)，混合均勻后，反應(yīng)30分鐘。

3.6.4.2 終止：充分反應(yīng)后在攪拌中加入金標(biāo)記過程終止液（20ul/1ml金溶液）；繼續(xù)攪拌30分鐘直至混勻。

3.6.4.3將膠聯(lián)溶液離心，9000轉(zhuǎn)離心6分鐘，收集沉淀并用金工作液定容至總體積的1/10；

3.6.4.4儲(chǔ)存： 2～8℃，有效期6個(gè)月。

3.6.5  鋪金液配制

3.6.5.1用工作液將1/10體積的乙肝病毒表面抗原金標(biāo)記物沉淀放大10倍；兔IgG金標(biāo)記物沉淀按1/3乙肝病毒表面抗原沉淀的量，加至上述乙肝金標(biāo)工作液中（即兔IgG金標(biāo)記物沉淀為乙肝的1/3）

3.6.5.2按0.2mg/ml的量加入抗RBC到鋪金液中；

3.6.6 小樣試驗(yàn)：在鋪金和劃膜之前，應(yīng)首先將待鋪的基因重組抗原-膠體金復(fù)合物溶液，先鋪一條玻纖（6mm×310mm）上，用配好的質(zhì)控線液、檢測(cè)線液劃膜一張，與其他組分組合在一起，進(jìn)行檢測(cè)，要求：

陰性參考品符合率：20份陰性參考品符合率（-/-）應(yīng)為20/20。

靈敏度：靈敏度參考血清，呈陽(yáng)性反應(yīng)。

精密性：連續(xù)重復(fù)測(cè)定精密性參考品10次，反應(yīng)結(jié)果應(yīng)均為陽(yáng)性，且顯色度均一。

3.6.7 鋪金

3.6.7.1按每張玻纖可以鋪金36ml計(jì)算金標(biāo)液的體積

3.6.7.2按計(jì)算好的體積在每張玻纖上鋪金，并用圓形試管刮均勻。

3.6.7.3 30%濕度以下，37～40℃干燥18～24小時(shí)，如不立即使用，加干燥劑鋁箔袋封存。

3.6.7.4儲(chǔ)存：保存過程中嚴(yán)格防潮，以后打開和使用一定要在30%濕度以下。

3.6.7膜包被

按照《劃膜機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》，以“252”泵速（對(duì)應(yīng)速度2.7ul/cm），將質(zhì)控線液和檢測(cè)線液均勻地劃在膜上，質(zhì)控線劃在距膜頂端12.1±0.1cm處，檢測(cè)線劃在距膜頂端12.5cm±0.1cm處，質(zhì)控線與檢測(cè)線相距5mm±1mm。

3.6.7.2  30%濕度以下，37～40℃干燥18～24小時(shí)，如不立即使用，加干燥劑鋁箔袋封存。

3.6.7.3儲(chǔ)存：保存過程中嚴(yán)格防潮，以后打開和使用一定要在30%濕度以下。

3.6.8 樣品墊的準(zhǔn)備

3.6.8.1按每張玻纖可以鋪液36ml計(jì)算全血樣品墊處理液的體積

3.6.8.2按計(jì)算好的體積在每張玻纖上鋪液，并用圓形試管刮均勻。

3.6.8.3 30%濕度以下，37～40℃干燥18～24小時(shí)，如不立即使用，加干燥劑鋁箔袋封存。

3.6.8.4儲(chǔ)存：保存過程中嚴(yán)格防潮，以后打開和使用一定要在30%濕度以下。

3.6.9半成品檢測(cè)：以上生產(chǎn)出來的膠體金、膠金墊、包被膜、分裝好的樣品稀釋液均應(yīng)作為半成品請(qǐng)檢，質(zhì)量管理部QC按照《半成品檢驗(yàn)作業(yè)指導(dǎo)書》檢驗(yàn)合格方可進(jìn)入下一道工序。

3.6.10 組裝

3.6.10.1 按照《貼膜組裝工序作業(yè)指導(dǎo)書》的規(guī)定，將包被好的NC膜貼在塑料大卡上。 3.6.10.2各組成部分的切割：各組分用切割機(jī)切割成以下大小：

金標(biāo)墊：6mm × 310mm    樣品墊：15mm ×310mm     吸水墊：20mm×310mm

不干膠紙：13mm× 310mm

3.6.10.3 層壓

將上述切割好的材料進(jìn)行貼膜制成乙型肝炎表面抗體膠體金試紙條，各膜層疊關(guān)系如下：

1）   不干膠紙

2）   樣品墊

3）金結(jié)合物墊     

4）包被有檢測(cè)線（T線）和質(zhì)控線（C線）的硝酸纖維素膜

5）吸水墊

6）塑料襯片

3.6.10.4 層壓參數(shù)

金標(biāo)墊2片，第一片搭上NC膜2mm， 第二片搭第一片3mm ；樣品墊15mm，搭上金標(biāo)墊2mm；吸水墊20mm，搭上NC膜2mm，不干膠13mm，搭上露出的NC膜2mm。   

3.6.11切條

（1）組裝環(huán)境條件的控制在相對(duì)濕度30%以下，并所有組件拆封后暴露于空氣中時(shí)間不超過2小時(shí)。

（2）按照《切條工序作業(yè)指導(dǎo)書》使用切條機(jī)，將組裝好的乙肝病毒表面抗體檢測(cè)試劑切割成寬度為2.5mm±0.1mm試條，切條過程中應(yīng)于前、后及過程中每30分鐘對(duì)切條的寬度檢查一次。

3.6.12檢測(cè)卡的裝配

按照不同規(guī)格的要求，需要進(jìn)行檢測(cè)卡裝配的試紙條先把切好的試條裝配到完好的PVC卡中，再用壓卡機(jī)進(jìn)行壓卡，裝條時(shí)應(yīng)注意檢查條有無劃痕污漬，寬度是否符合要求；PVC卡外觀應(yīng)清潔，平整，無變形，底面配套性好，壓卡應(yīng)注意調(diào)節(jié)松緊度，避免將卡壓破或變形。

3.6.13內(nèi)包裝

3.6.13.1  成品規(guī)格為25支/盒、50支/盒的，所對(duì)應(yīng)半成品的內(nèi)包裝：

（1）裝卡：?jiǎn)蝹�(gè)卡和無水硅膠干燥劑一起放入鋁箔袋中，卡印字方向應(yīng)朝向鋁箔袋開口方向，確保無漏裝。

（2）密封。密封時(shí)應(yīng)檢查密封的效果及鋁箔袋上的效期印字是否正確，使用封口機(jī)進(jìn)行封口。

3.6.13.2  成品規(guī)格為100支/盒的，所對(duì)應(yīng)半成品的內(nèi)包裝

裝筒，將無卡試紙以25支/筒的規(guī)格裝入筒中，放入干燥劑，然后封筒。

3.6.14 外包裝

（1）不干膠標(biāo)簽批號(hào)、生產(chǎn)日期、有效期打�。阂栽嚰垪l組裝日期為“生產(chǎn)日期”，并由此推算出“有效期至”，批號(hào)按照《批號(hào)管理規(guī)程》的規(guī)定設(shè)置。按照《批號(hào)打印機(jī)使用、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》進(jìn)行操作打印標(biāo)簽、包裝盒上的“三期”。

（2）貼簽：在上述裝好檢測(cè)卡的鋁箔袋及裝好試紙條的筒上貼上標(biāo)簽。

（3）成品組裝：

紙盒內(nèi)組份：

按包裝盒標(biāo)準(zhǔn)折疊方法折好包裝盒，根據(jù)成品組分名稱、規(guī)格及數(shù)量，分別裝入檢測(cè)卡鋁箔袋或試紙筒、樣品稀釋液、說明書。包裝組組長(zhǎng)每盒清點(diǎn)查看，合格后用封口簽（合格證）封口。

（4）儲(chǔ)存：2～30℃，有效期24個(gè)月。

3.6.15.成品檢定：抽檢量為3%，最小抽檢量為500人份。經(jīng)質(zhì)量管理部QC檢測(cè)合格，QA做生產(chǎn)記錄審核后開具《成品放行審核單》方可入庫(kù)。

3.7 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

3.7.1.主要原輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及依據(jù)：

（1）重組乙肝抗原

（2）兔IgG抗體

（3）羊抗兔IgG

（4）兔抗RBC

（6）    硝酸纖維素膜：Millipore  Hiflow  Plus  18002硝酸纖維素膜

（7）    玻璃纖維紙

3.7.2半成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：

（1）膠體金

（2）膠金墊

（3）包被膜

（4）樣品稀釋液

3.7.3成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：

3.8.質(zhì)量控制

3.8.1.主要質(zhì)量控制點(diǎn)：

按生產(chǎn)工序和工藝特點(diǎn)規(guī)定生產(chǎn)過程中的主要質(zhì)量控制點(diǎn)，如下表所示：

3.8.2.監(jiān)控頻次

每個(gè)質(zhì)量控制點(diǎn)均應(yīng)在該工序生產(chǎn)操作開始前、操作過程中、操作結(jié)束后進(jìn)行三次監(jiān)控，對(duì)于用時(shí)較長(zhǎng)工序需適當(dāng)增加監(jiān)控頻次。

3.8.3.監(jiān)控方法

(1) 生產(chǎn)前，檢查人員、設(shè)備、物料、環(huán)境是否符合工藝標(biāo)準(zhǔn)，并達(dá)到相應(yīng)衛(wèi)生要求，檢查結(jié)束后決定是否準(zhǔn)許開始生產(chǎn)。

(2) 檢查物料名稱、級(jí)別、數(shù)量、外觀、狀態(tài)標(biāo)識(shí)、存放條件是否符合工藝要求和生產(chǎn)規(guī)模，原輔料、包裝材料及半成品的質(zhì)量是否符合要求。

(3) 檢查設(shè)備、儀器、器具是否有狀態(tài)標(biāo)識(shí)，處于清潔、完好狀態(tài)。

(4) 各相關(guān)的記錄、憑證是否齊全，生產(chǎn)過程中的記錄是否完整、規(guī)范。

(5) 檢查生產(chǎn)工藝規(guī)程和崗位標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的執(zhí)行情況，生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)是否有序、規(guī)范。

(6) 在質(zhì)量控制點(diǎn)工序的操作過程中實(shí)行雙人核對(duì)，QA對(duì)生產(chǎn)全過程進(jìn)行監(jiān)督。

3.8.4.重點(diǎn)工序的監(jiān)控

(1) 定量配料、定額包裝是保證產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵工序，對(duì)物料質(zhì)量、投料量是否符合要求實(shí)施重點(diǎn)監(jiān)控。

(2) 生產(chǎn)環(huán)境（潔凈度、溫度、濕度、壓差）是否達(dá)標(biāo)是保證生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化和合格率的基本條件，實(shí)施重點(diǎn)監(jiān)控。

(3) 所有半成品生產(chǎn)完畢后分別取樣進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，對(duì)半成品質(zhì)量是否符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施重點(diǎn)監(jiān)控。

(4) 對(duì)包裝過程中的批號(hào)和有效期打印、包裝數(shù)量、包裝材料使用實(shí)施重點(diǎn)監(jiān)控。

3.9.主要生產(chǎn)設(shè)備一覽表

3.10.技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)的計(jì)算

3.10.1.最低生產(chǎn)量：

根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)和生產(chǎn)能力確定本產(chǎn)品的最低生產(chǎn)量1萬條

3.10.2.物料消耗定額標(biāo)準(zhǔn)：

根據(jù)1萬條/批的最低生產(chǎn)量制定物料消耗定額標(biāo)準(zhǔn)，并以該標(biāo)準(zhǔn)作為批生產(chǎn)物料需求統(tǒng)計(jì)、經(jīng)濟(jì)技術(shù)指標(biāo)和物料平衡計(jì)算的依據(jù)。

(1)主要原輔料的消耗定額標(biāo)準(zhǔn)：

根據(jù)各種試劑批制備量的確定方法，計(jì)算主要原輔料的消耗定額標(biāo)準(zhǔn)（如下表所示）。

3.10.2.包裝材料的消耗定額（按1萬人份量核算）：

3.11.物料平衡檢查和收率計(jì)算

3.11.1.定義：

(1)物料平衡：指產(chǎn)品或物料的實(shí)際產(chǎn)量（或用量）與理論產(chǎn)量（或用量）之間的百分比，可適當(dāng)考慮可允許的偏差范圍。

 (2)收率：指半成品、成品的實(shí)際產(chǎn)量（或合格品產(chǎn)量）與理論產(chǎn)量（或投料量）之間的百分比，可適當(dāng)考慮可允許的偏差范圍。

(3)理論產(chǎn)量：指按照所用的原料、輔料、包裝材料量，在生產(chǎn)中無任何損失或差錯(cuò)

的情況下產(chǎn)出的最大數(shù)量。

 (4)實(shí)際產(chǎn)量：指生產(chǎn)過程中的實(shí)際產(chǎn)出量，包括產(chǎn)出的合格品量、檢驗(yàn)品量。

3.11.2.物料平衡和收率計(jì)算方法：

(1)物料平衡 ＝ 實(shí)際產(chǎn)量（用量）／理論產(chǎn)量（用量）× 100%

(2)收率 = 合格品產(chǎn)量 / 理論產(chǎn)量 × 100%（可考慮適當(dāng)偏差范圍）。

3.11.3.關(guān)鍵工序的收率范圍：

3.12.工藝衛(wèi)生

按以下衛(wèi)生管理規(guī)程和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程執(zhí)行：

3.13.生產(chǎn)安全和勞動(dòng)保護(hù)

    按以下管理規(guī)程執(zhí)行：

3.14.勞動(dòng)組織與生產(chǎn)崗位定員

按《組織機(jī)構(gòu)管理規(guī)程》、《員工培訓(xùn)管理規(guī)程》、《人員健康管理規(guī)程》執(zhí)行。

3.15.環(huán)境保護(hù)

按《廠區(qū)環(huán)境衛(wèi)生管理規(guī)程》、《“三廢”管理規(guī)程》執(zhí)行。

4.  附件

4.1.STP-08-3-001-R01-01《批生產(chǎn)記錄》

4.2.STP-08-3-001-R02-01《批分裝記錄》

4.3.STP-08-3-001-R03-01《批包裝記錄》

4.4. 《膠體金工藝流程圖》

各膜層疊關(guān)系如下：

3）   不干膠紙

4）   樣品墊

3）金結(jié)合物墊     

4）包被有檢測(cè)線（T線）和質(zhì)控線（C線）的硝酸纖維素膜

5）吸水墊

6）塑料襯片

3.4.1.某金標(biāo)試劑盒組成：